સેલ્યુલોઝ એસીટેટ મેમ્બ્રેન ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દ્વારા સીરમ પ્રોટીનને અલગ કરવાનો પ્રયોગ

સિદ્ધાંત

સેલ્યુલોઝ એસીટેટ ફિલ્મ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ એ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પદ્ધતિ છે જે સેલ્યુલોઝ એસીટેટ ફિલ્મને સપોર્ટ તરીકે ઉપયોગ કરે છે.વિદ્યુત ક્ષેત્રની ક્રિયા હેઠળ ચાર્જ થયેલ કણો વિરુદ્ધ વિદ્યુતધ્રુવ તરફ આગળ વધે છે તે ઘટનાને ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ કહેવાય છે.દરેક પ્રોટીનનો ચોક્કસ આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ હોવાથી, જો પ્રોટીનને તેના આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ કરતાં ઓછી pH ધરાવતા સોલ્યુશનમાં મૂકવામાં આવે છે, તો પ્રોટીન હકારાત્મક રીતે ચાર્જ થશે અને નકારાત્મક ઇલેક્ટ્રોડ તરફ જશે.તેનાથી વિપરિત, તે હકારાત્મક ધ્રુવ તરફ જાય છે.કારણ કે ઇલેક્ટ્રિક ફિલ્ડમાં ફરતા પ્રોટીન પરમાણુઓની ઝડપ તેમના ચાર્જ, અણુઓના આકાર અને કદ સાથે સંબંધિત છે, વિવિધ પ્રોટીનને ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દ્વારા અલગ કરી શકાય છે.સીરમમાં વિવિધ પ્રકારના પ્રોટીન હોય છે, જે તમામમાં pH7.5 અથવા તેનાથી ઓછા પર આઇસોઇલેક્ટ્રિક પોઇન્ટ હોય છે.જ્યારે સીરમને ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ચલાવવા માટે pH 8.6 બફરમાં મૂકવામાં આવે છે, ત્યારે તમામ સીરમ પ્રોટીન નકારાત્મક રીતે ચાર્જ થાય છે અને ઇલેક્ટ્રિક ફિલ્ડમાં હકારાત્મક બાજુ તરફ આગળ વધે છે.વિવિધ સીરમ પ્રોટીન એક જ pH પર અલગ-અલગ ચાર્જ ધરાવતા હોવાથી, પરમાણુ કણો કદમાં ભિન્ન હોય છે, અને આમ સ્થળાંતર ઝડપ અલગ હોય છે, અને તેઓ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ દ્વારા અલગ પડે છે.સીરમ પ્રોટીનના આઇસોઇલેક્ટ્રિક બિંદુઓ અને પરમાણુ વજન નીચેના કોષ્ટકમાં બતાવવામાં આવ્યા છે:

સેલ્યુલોઝ એસીટેટ મેમ્બ્રેન (abbr. CAM) સાથે રક્ત સીરમમાં વિવિધ પ્રોટીનને સપોર્ટ મીડિયા તરીકે અલગ કરવાનો પ્રયોગ છે.CAM એ એક પ્રકારનું ફોમ્ડ લૂઝ છેeસારી યુનિફોર્મ સાથેની ફિલ્મ, અને જાડાઈ 0.1mm-1.5mm છે, જેમાં ચોક્કસ પાણી શોષણ છે.

CAM ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે સામગ્રી, સાધનો અને રીએજન્ટ્સ

નમૂનાઓ:તંદુરસ્ત માનવ રક્ત સીરમ

સાધન:પાવર સપ્લાય DYY-6C, ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ ટાંકી DYCP-38C, શ્રેષ્ઠ નમૂના લોડિંગ WD-9404

રીએજન્ટ્સ

1) સેલ્યુલોઝ એસિટેટ પટલ 7X9cm

2) PH 8.6 બાર્બિટોલ બફર સોલ્યુશન (આયનીય તાકાત 0.05-0.09, તે 0.06નો સમય છે.): 1,84g ડાયથાઈલ બાર્બિટ્યુરિક એસિડ લો, અને પછી 1.03g ડાયથાઈલ સોડિયમ પેન્ટોબાર્બીટલ લો, ઓગળવા માટે ગરમ કરવા માટે થોડું નિસ્યંદિત પાણી ઉમેરો, અને બનાવો 1000ml સુધી;

3) ડાઘ: Ponceau S 0.2g, Trichloroacetic 3g, 100ml નિસ્યંદિત પાણી ઉમેરો;

4) TBS/T અથવા PBS/T: 45ml 95% ઇથેનોલ, 5ml ગ્લેશિયલ એસિટિક એસિડ, 50ml નિસ્યંદિત પાણી ઉમેરો;

5) ક્લિનિંગ સોલ્યુશન: 70ml નિર્જળ ઇથેનોલ, 30ml ગ્લેશિયલ એસિટિક એસિડ.

મેથોનો પ્રયોગ કરોd

1) પટલ તૈયાર કરો: પટલને બાર્બીટોલ બફર સોલ્યુશન 30 મિનિટ-8 કલાકમાં બોળી દો, અને તેને બહાર કાઢો, શોષક કાગળ દ્વારા વધારાનું દ્રાવણ દૂર કરો.

2) નમૂનાઓ લોડ કરી રહ્યા છે: પટલની ખરબચડી બાજુ અને સરળ બાજુને અલગ કરો, અને ખરબચડી બાજુના ઉપરના છેડા સુધી 1.5cm અંતરે એક રેખાને ચિહ્નિત કરો.રફ બાજુ પર શ્રેષ્ઠ નમૂના લોડિંગ સાધન દ્વારા નમૂનાઓ લોડ કરો.નોંધ: નમૂનાઓ પટલની ખરબચડી બાજુ પર લોડ થવી જોઈએ.સીરમના નમૂનાઓ સંપૂર્ણપણે પટલમાં ઘૂસી ગયા પછી, પટલને ફેરવો, ખરબચડી બાજુ (નમૂનાઓ સાથે) ટાંકીની નીચે મુકો, અને નમૂનાઓ સાથેનો અંત નકારાત્મક ઇલેક્ટ્રોડમાં મૂકવામાં આવે છે.

3) ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ: પાવર સપ્લાય ચાલુ કરો, 0.4～0.6m A/cm પટલ, ચાલવાનો સમય 30-45 મિનિટ છે.ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ચલાવ્યા પછી, પાવર બંધ કરો.

4) ડાઘ અને સાફ કરો: ટાંકીમાંથી પટલને બહાર કાઢો અને નિમજ્જન કરોit 5 મિનિટ માટે ડાઇ સોલ્યુશનમાં નાખો, અને પછી પૃષ્ઠભૂમિનો રંગ સ્પષ્ટ ન થાય ત્યાં સુધી તેને 3-4 વખત ક્લિનિંગ સોલ્યુશનમાં સાફ કરો.સીરમ પ્રોટીન બેન્ડ્સ પર દર્શાવવા જોઈએ, અને સામાન્ય રીતે પાંચ ઝોન હોય છે, જે ચિહ્નિત રેખાના ઉપરના છેડાની રચના કરે છે, આલ્બ્યુમિન, α1-ગ્લોઉલિન, α2-ગ્લોલિન, β-ગ્લોઉલિન, γ-ગ્લોલિન.

5) જાળવણી: ડ્રાય ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ મૂકોબેન્ડ10-15 મિનિટ માટે સફાઈ દ્રાવણમાં, અને પછી તેને બહાર કાઢો અને તેને સ્વચ્છ કાચ પર ચોંટાડો, તે સુકાઈ જાય પછી, તે એક પારદર્શક ફિલ્મ બની જશે.બેન્ડ.

પ્રયોગપરિણામ

સીરમ સેમ્પલની વિભાજન અસર સારી છે, અને બેન્ડ ટેલિંગની કોઈ ઘટના નથી.પરિણામોની પુનરાવર્તિતતા પરીક્ષણ પ્રક્રિયાઓ અને પ્રયોગકર્તાની પદ્ધતિઓને કારણે બદલાય છે, અને પુનરાવર્તિતતા વધારે છે.

નિષ્કર્ષ

ઝડપી ક્લિનિકલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ડિટેક્શન સિસ્ટમ (ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ ટાંકીDYCP-38C,વીજ પુરવઠોDYY-6C અને શ્રેષ્ઠ નમૂના લોડિંગ WD-9404) અમારા દ્વારા ઉત્પાદિતકંપની બેઇજિંગ લિયુઇ બાયોટેકનોલોજી કો., લિપ્રાયોગિક જરૂરિયાતોને પૂર્ણ કરે છે,અનેપરિણામો પુનઃઉત્પાદનક્ષમ, સરળ અને ઝડપી, માટે યોગ્ય છેશિક્ષણસંશોધન.

બેઇજિંગ લિયુઇબાયોટેક્નોલોજી કું., લિમિટેડ જીવન વિજ્ઞાન ઉદ્યોગ માટે ઇલેક્ટ્રોફોરેસિસ ઉત્પાદનોના ઉત્પાદનમાં નિષ્ણાત છે, જેચીનમાં 50 વર્ષથી વધુનો ઇતિહાસ ધરાવે છે અને કંપની સમગ્ર વિશ્વમાં સ્થિર અને ઉચ્ચ-ગુણવત્તાવાળા ઉત્પાદનો પ્રદાન કરી શકે છે.વર્ષોના વિકાસ દ્વારા, તે તમારી પસંદગી માટે યોગ્ય છે!

અમે હવે ભાગીદારો શોધી રહ્યા છીએ, OEM ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ટાંકી અને વિતરકો બંનેનું સ્વાગત છે.

અમારા વિશે વધુ માહિતી માટે, કૃપા કરીને ઇમેઇલ દ્વારા અમારો સંપર્ક કરો[ઇમેઇલ સુરક્ષિત]અથવા[ઇમેઇલ સુરક્ષિત].