એગારોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસની મૂળભૂત તકનીકો(2)

નમૂનાની તૈયારી અનેલોડ કરી રહ્યું છે

મોટાભાગના કિસ્સાઓમાં સ્ટેકીંગ જેલ વિના સતત બફર સિસ્ટમના ઉપયોગને કારણે, નમૂનાઓમાં યોગ્ય સાંદ્રતા અને નાની માત્રા હોવી જોઈએ. એનો ઉપયોગ કરોપિપેટરીઝોલ્યુશનમાં નોંધપાત્ર ઘટાડો ટાળવા માટે, કૂવા દીઠ 5-10 μg સાથે ધીમે ધીમે નમૂના ઉમેરવા માટે. જ્યારેનમૂના લોડ કરી રહ્યું છે, વીજ પુરવઠો બંધ હોવો જોઈએ. નમૂનામાં તેની ઘનતા વધારવા, નમૂનાને કેન્દ્રિત કરવા અને પ્રસારને રોકવા માટે સૂચક રંગ (0.025% બ્રોમોફેનોલ વાદળી અથવા નારંગી) અને સુક્રોઝ (10-15%) અથવા ગ્લિસરોલ (5-10%) હોવો જોઈએ. જો કે, કેટલીકવાર સુક્રોઝ અથવા ગ્લિસરોલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પરિણામોમાં U-આકારના બેન્ડનું કારણ બની શકે છે, જે 2.5% ફિકોલ (પોલીવિનાઇલપાયરોલિડન) નો ઉપયોગ કરીને ટાળી શકાય છે.

ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ

ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે વોલ્ટેજ 5-15 V/cm છે, સામાન્ય રીતે લગભગ 10 V/cm. મોટા પરમાણુઓને અલગ કરવા માટે, વોલ્ટેજ ઓછું હોવું જોઈએ, સામાન્ય રીતે 5 V/cm કરતાં વધુ ન હોવું જોઈએ.

સ્ટેનિંગ

ફ્લોરોસન્ટ ડાઇ એથિડિયમ બ્રોમાઇડ (EB) નો ઉપયોગ સામાન્ય રીતે એગેરોઝ જેલમાં DNA બેન્ડ જોવા માટે સ્ટેનિંગ માટે થાય છે. EB DNA પરમાણુઓની બેઝ જોડી વચ્ચે દાખલ કરી શકે છે, જેના કારણે EB DNA સાથે જોડાય છે. DNA દ્વારા 260 nm અલ્ટ્રાવાયોલેટ પ્રકાશનું શોષણ EB માં સ્થાનાંતરિત થાય છે, અને બાઉન્ડ EB દૃશ્યમાન પ્રકાશ સ્પેક્ટ્રમના લાલ-નારંગી પ્રદેશમાં 590 nm પર ફ્લોરોસેન્સનું ઉત્સર્જન કરે છે. જેલને 1 mmol/L MgSO4 સોલ્યુશનમાં 1 કલાક માટે સ્ટેન કરવાથી અનબાઉન્ડ EBને કારણે થતા બેકગ્રાઉન્ડ ફ્લોરોસેન્સને ઘટાડી શકાય છે, જેનાથી DNA ની નાની માત્રાની તપાસ કરવામાં મદદ મળે છે.

EB ડાયના ઘણા ફાયદા છે: તેનો ઉપયોગ કરવો સરળ છે, તે ન્યુક્લીક એસિડને તોડતું નથી, ઉચ્ચ સંવેદનશીલતા ધરાવે છે અને DNA અને RNA બંનેને ડાઘ કરી શકે છે. EB નમૂનામાં ઉમેરી શકાય છે અને કોઈપણ સમયે UV શોષણનો ઉપયોગ કરીને ટ્રેક કરી શકાય છે. સ્ટેનિંગ પછી, EB ને n-butanol સાથે નિષ્કર્ષણ દ્વારા દૂર કરી શકાય છે.

જો કે, EB ડાય એક શક્તિશાળી મ્યુટાજેન છે, અને સંભાળતી વખતે પોલિઇથિલિન ગ્લોવ્ઝ પહેરવા જેવી સાવચેતીઓ લેવી જોઈએ. એક્રીડિન નારંગી પણ સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતો રંગ છે કારણ કે તે સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ અને ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ન્યુક્લિક એસિડ્સ (DNA, RNA) વચ્ચે તફાવત કરી શકે છે. તે ડબલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ન્યુક્લિક એસિડ્સ માટે લીલો ફ્લોરોસેન્સ (530 nm) અને સિંગલ-સ્ટ્રેન્ડેડ ન્યુક્લિક એસિડ્સ માટે લાલ ફ્લોરોસેન્સ (640 nm) દર્શાવે છે. વધુમાં, અન્ય રંગો જેમ કે મેથીલીન બ્લુ, મેથીલીન ગ્રીન અને ક્વિનોલિન બીનો ઉપયોગ સ્ટેનિંગ માટે થઈ શકે છે.

Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) એ અમારી પોતાની વ્યાવસાયિક તકનીકી ટીમ અને R&D કેન્દ્ર સાથે 50 વર્ષથી વધુ સમયથી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ સાધનોના ઉત્પાદનમાં વિશેષતા પ્રાપ્ત કરી છે. અમારી પાસે ડિઝાઇનથી નિરીક્ષણ અને વેરહાઉસ, તેમજ માર્કેટિંગ સપોર્ટ સુધી વિશ્વસનીય અને સંપૂર્ણ ઉત્પાદન લાઇન છે. અમારા મુખ્ય ઉત્પાદનો છે ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ સેલ (ટાંકી/ચેમ્બર), ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પાવર સપ્લાય, બ્લુ એલઇડી ટ્રાન્સિલ્યુમિનેટર, યુવી ટ્રાન્સિલ્યુમિનેટર, જેલ ઇમેજ અને એનાલિસિસ સિસ્ટમ વગેરે.

અમે હવે ભાગીદારો શોધી રહ્યા છીએ, OEM ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ટાંકી અને વિતરકો બંનેનું સ્વાગત છે.

જો તમારી પાસે અમારા ઉત્પાદનો માટે કોઈ ખરીદીની યોજના છે, તો કૃપા કરીને અમારો સંપર્ક કરવામાં અચકાશો નહીં. તમે અમને ઈમેલ પર મેસેજ મોકલી શકો છો[ઇમેઇલ સુરક્ષિત]અથવા[ઇમેઇલ સુરક્ષિત], અથવા કૃપા કરીને અમને +86 15810650221 પર કૉલ કરો અથવા Whatsapp +86 15810650221, અથવા Wechat: 15810650221 ઉમેરો.

Whatsapp અથવા WeChat પર ઉમેરવા માટે કૃપા કરીને QR કોડ સ્કેન કરો.