1. વર્ગીકરણ
જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસને વર્ટિકલ પ્રકારો (કૉલમ જેલ્સ અને સ્લેબ જેલ્સ સહિત) અને આડા પ્રકારો (મુખ્યત્વે સ્લેબ જેલ્સ) (આકૃતિ 6-18) માં વિભાજિત કરવામાં આવે છે. સામાન્ય રીતે, ઊભી વિભાજન આડી કરતા સહેજ ચઢિયાતું હોય છે, પરંતુ આડી જેલની તૈયારીમાં ઓછામાં ઓછા ચાર ફાયદા છે: સમગ્ર જેલની નીચે ટેકો હોય છે, જે ઓછી સાંદ્રતાવાળા એગોરોઝના ઉપયોગને મંજૂરી આપે છે; વિવિધ વિશિષ્ટતાઓની એગ્રોઝ જેલ પ્લેટો તૈયાર કરવી શક્ય છે; જેલની તૈયારી અને નમૂના લોડ કરવાનું વધુ અનુકૂળ છે; ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ચેમ્બર બાંધવામાં સરળ અને ખર્ચ-અસરકારક છે. ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફરની સપાટીથી લગભગ 1 મીમી નીચે સંપૂર્ણપણે ડૂબી ગયેલી એગ્રોઝ જેલ પ્લેટ સાથે આડી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ કરવામાં આવતી હોવાથી, તેને ડૂબેલું ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પણ કહેવામાં આવે છે.
એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ માટે ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ટાંકી DYCP-31DN
2.બફર સિસ્ટમ
ન્યુક્લિક એસિડ વિભાજનમાં, મોટાભાગની સિસ્ટમો સતત સિસ્ટમો અપનાવે છે. સામાન્ય રીતે ઉપયોગમાં લેવાતા ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફર્સમાં TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L બોરિક એસિડ, 0.0024mol/L EDTA) બફર અને THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L) નો સમાવેશ થાય છે. સોડિયમ એસિટેટ, 0.0018mol/L EDTA) બફર. આ બફર્સ સામાન્ય રીતે 10x સ્ટોક સોલ્યુશન તરીકે તૈયાર કરવામાં આવે છે અને ઉપયોગમાં લેવાતી વખતે જરૂરી એકાગ્રતામાં પાતળું કરવામાં આવે છે. એગ્રોઝ જેલમાં રેખીય અને ગોળાકાર DNA ના સ્થળાંતર દરો વપરાયેલ બફર સાથે બદલાય છે. બફરમાં, રેખીય ડીએનએનું સ્થળાંતર દર ગોળાકાર ડીએનએ કરતા વધારે છે, જ્યારે TBE બફરમાં, તેનાથી વિરુદ્ધ સાચું છે.
3. Agarose જેલ ની તૈયારી
(1) હોરીઝોન્ટલ એગેરોઝ જેલની તૈયારી
(a) 1x ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફરનો ઉપયોગ કરીને એગેરોઝ જેલની જરૂરી સાંદ્રતા તૈયાર કરો.
(b) ઉકળતા પાણીના સ્નાનમાં, ચુંબકીય સ્ટિરર પર અથવા માઇક્રોવેવમાં વિસર્જન પૂર્ણ કરવા માટે એગરોઝને ગરમ કરો. એગ્રોઝ સોલ્યુશનને 55°C પર ઠંડુ કરો અને 0.5 μg/ml ની અંતિમ સાંદ્રતામાં એથિડિયમ બ્રોમાઇડ (EB) ડાઇ ઉમેરો.
(c) કાચ અથવા એક્રેલિક પ્લેટની કિનારીઓને એગેરોઝ જેલની થોડી માત્રાથી સીલ કરો, કાંસકો ઉમેરો અને કાંસકોના દાંતને પ્લેટની ઉપર લગભગ 0.5~1.0 મીમી રાખો.
(d) ઓગળેલા એગેરોઝ જેલના દ્રાવણને કાચ અથવા એક્રેલિક પ્લેટ મોલ્ડમાં સતત રેડો (જાડાઈ DNA નમૂનાના જથ્થા પર આધારિત છે), હવાના પરપોટાના પ્રવેશને ટાળીને. ઓરડાના તાપમાને તેને કુદરતી રીતે નક્કર થવા દો.
(e) સંપૂર્ણ નક્કરતા પછી કાંસકો કાળજીપૂર્વક દૂર કરો. જેલ ટાંકીમાં યોગ્ય માત્રામાં ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફર ઉમેરો, ખાતરી કરો કે જેલ પ્લેટ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફરની સપાટીથી લગભગ 1 મીમી નીચે ડૂબી ગઈ છે.
(2) વર્ટિકલ એગારોઝ જેલની તૈયારી
(a) ઈથેનોલથી ધોઈને કાચની પ્લેટમાંથી ગ્રીસ અથવા અવશેષો દૂર કરો.
(b) આગળ અને પાછળના ડેમ વચ્ચે સ્પેસર પ્લેટો મૂકો, સ્પેસર પ્લેટની કિનારીઓને આગળ અને પાછળના ડેમ સાથે સંરેખિત કરો અને તેમને ક્લેમ્પ્સ વડે સુરક્ષિત કરો.
(c) જેલ કાસ્ટિંગ ચેમ્બરના તળિયે 1 સેમી ઉંચો એગેરોઝ પ્લગ બનાવવા માટે સ્પેસર પ્લેટની કિનારીઓ વચ્ચે 1x બફરમાં 2% એગેરોઝ ઉમેરો.
(d) 1x બફરમાં તૈયાર કરેલી ઇચ્છિત સાંદ્રતા પર ઓગળેલા એગેરોઝ જેલને ટોચની નીચે 1 સેમી સુધી જેલ ચેમ્બરમાં રેડો.
(e) કાંસકો દાખલ કરો, કાંસકો દાંત નીચે હવાના પરપોટા ફસાવવાનું ટાળો. કેટલીકવાર, એગોરોઝ જેલના ઠંડક દરમિયાન કાંસકોના દાંત પર કરચલીઓ દેખાઈ શકે છે; આવા કિસ્સાઓમાં, તેને નક્કર બનાવવા માટે ટોચ પર થોડું ઓગાળેલું એગરોઝ ઉમેરો.
(f) કાંસકો દૂર કરો. લોડિંગ સ્લોટમાં બફર લીકેજને રોકવા માટે, એગેરોઝ જેલ પ્લેટ અને ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ચેમ્બર વચ્ચેના જોડાણને 2% એગેરોઝ વડે સીલ કરો અને જરૂરી માત્રામાં બફર ઉમેરો.
(g) જેલ ચેમ્બરમાં 1x ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ બફર ઉમેરો.
(h) બફરની નીચે એગોરોઝ જેલ પર ડીએનએ નમૂનાઓ કાળજીપૂર્વક લોડ કરો.
એગેરોઝ જેલ ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ વિશેના મૂળભૂત જ્ઞાન વિશે વધુ માહિતી, અમે આવતા અઠવાડિયે શેર કરીશું. ઈચ્છો કે આ માહિતી તમારા પ્રયોગ માટે મદદરૂપ થાય.
Beijing Liuyi Biotechnology Co. Ltd (Liuyi Biotechnology) એ અમારી પોતાની વ્યાવસાયિક તકનીકી ટીમ અને R&D કેન્દ્ર સાથે 50 વર્ષથી વધુ સમયથી ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ સાધનોના ઉત્પાદનમાં વિશેષતા પ્રાપ્ત કરી છે. અમારી પાસે ડિઝાઇનથી નિરીક્ષણ અને વેરહાઉસ, તેમજ માર્કેટિંગ સપોર્ટ સુધી વિશ્વસનીય અને સંપૂર્ણ ઉત્પાદન લાઇન છે. અમારા મુખ્ય ઉત્પાદનો છે ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ સેલ (ટાંકી/ચેમ્બર), ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ પાવર સપ્લાય, બ્લુ એલઇડી ટ્રાન્સિલ્યુમિનેટર, યુવી ટ્રાન્સિલ્યુમિનેટર, જેલ ઇમેજ અને એનાલિસિસ સિસ્ટમ વગેરે.
અમે હવે ભાગીદારો શોધી રહ્યા છીએ, OEM ઇલેક્ટ્રોફોરેસીસ ટાંકી અને વિતરકો બંનેનું સ્વાગત છે.
જો તમારી પાસે અમારા ઉત્પાદનો માટે કોઈ ખરીદીની યોજના છે, તો કૃપા કરીને અમારો સંપર્ક કરવામાં અચકાશો નહીં. તમે અમને ઈમેલ પર મેસેજ મોકલી શકો છો[ઇમેઇલ સુરક્ષિત]અથવા[ઇમેઇલ સુરક્ષિત], અથવા કૃપા કરીને અમને +86 15810650221 પર કૉલ કરો અથવા Whatsapp +86 15810650221, અથવા Wechat: 15810650221 ઉમેરો.
Whatsapp અથવા WeChat પર ઉમેરવા માટે કૃપા કરીને QR કોડ સ્કેન કરો.
પોસ્ટ સમય: ડિસેમ્બર-07-2023